ОПРЕДЕЛЕНИЕ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ДОБРОКАЧЕСТВЕННОСТИ ЗЕЛЕНЫХ ЛИСТЬЕВ БАДАНА, СОБРАННЫХ ИЗ РАЗНЫХ РАЙОНОВ ПРОИЗРАСТАНИЯ И ПО ФАЗАМ ВЕГЕТАЦИИ Л.М. Федосеева Алтайский государственный медицинский университет, Барнаул, (Россия)

Зеленые листья бадана содержат комплекс фенольных соединений и могут использоваться как мочегонное антимикробное средство. В настоящее время актуален вопрос о качестве сырья, так как листья бадана включают в состав фитосборов и фиточаев, но до сих пор нет нормативной документации для проведения фармакогностического анализа. Целью работы является установление показателей доброкачественности зеленых листьев бадана и определение сроков заготовки сырья. Для получения достоверных результатов анализировали зеленые листья бадана, заготовленные на Алтае, в Иркутской области, Бурятии. Установлены следующие числовые показатели: влажность, зола общая, зола, нерастворимая в 10%-ной соляной кислоте, органические и минеральные примеси, экстрактивные вещества, содержание арбутина и дубильных веществ. Для установления сроков заготовки сырья изучали листья бадана, собранные по фазам вегетации.

Введение


Бадан Толстолистный (Bergenia crassifolia Fisch.) – семейство камнеломковые (Saxifragaceae), вечнозеленый травянистый многолетник с мощным мясистым густо ветвящимся корневищем. Верхушка корневища и его ветвей дает ежегодную розетку листьев и один цветоносный безлистный стебель. Листья в количестве 1–12 прикорневые, длинночерешковые, кожистые. Листовая пластинка широкоэллиптическая или почти округлая, основание сердцевидное, край с тупыми зубчиками, жилкование нервносетчатое. Длина до 35 см, ширина до 30 см. Стебель заканчивается крупным густым метельчато-щитковым соцветием с крупными пятимерными цветками. Околоцветник двойной, чашечка зеленая, венчик лилово-розовый. Плод - коробочка. Цветет в мае–июне до появления молодых листьев.

Интересен цикл развития растения.
Зеленые листья остаются в течение нескольких вегетационных периодов по два–три года. Обычно они отмирают к концу сентября третьего года.
Листья первого года теряют тургор к концу октября и восстанавливают его в начале мая следующего года.
Верхушечная почка после перезимовки остается живой и из нее появляются и развиваются молодые листья (листья первого года) [1, 2].
Поскольку бадан развивается несколько лет на одном растении находятся
- зеленые листья,
- красные – листья третьего–четвёртого года,
- бурые –листья четвертого–пятого года.

На протяжении ряда лет на кафедре фармакогнозии АГМУ проводят фармакотехнологическое изучение зеленых, красных и бурых листьев бадана. Данная работа посвящена изучению зеленых листьев бадана. Зеленые листья бадана содержат значительное количество фенольных соединений: арбутин, гидрохинон, дубильные вещества, флавоноиды и пр. [3]. Ранее нами проведены исследования зеленых листьев бадана на мочегонную и антимикробную активность. Получены положительные результаты, поэтому их можно рекомендовать для использования наравне с листьями толокнянки как дополнительный источник арбутинсодержащего сырья для лечения заболеваний мочевыводящих путей [4, 5].
Кроме того, листья бадана широко применяют в составе фитосборов и фиточаев в качестве биологически активных добавок. Нормативной документации для определения качества сырья нет.
Целью настоящей работы явилось определение показателей доброкачественности зеленых листьев бадана и установление сроков заготоки сырья.

Экспериментальная часть


Известно, что содержание биологически активных веществ подвержено значительным колебаниям в зависимости от места произрастания и фазы вегетации. Для проведения исследований использовали зеленые листья бадана, собранные в 4–х районах Алтая (Майминский, Турочакский, Шеболинский, Чарышский), в Иркутской области (Усть-кутский), в Бурятии (Северо-Байкальский).
Собирали по 5 серий сырья, проводили по 6 параллельных опытов. Сушку проводили в сушилках при температуре 80–100°С, при этом сохраняется зеленая окраска листьев и устойчивое содержание действующих веществ [6].
Определяли следующие показатели доброкачественности: влажность, зола общая, зола, нерастворимая в 10%-ной соляной кислоте, органические и минеральные примеси, экстрактивные вещества, содержание арбутина и дубильных веществ. Числовые показатели сырья изучали по методикам Государственной фармакопеи ХI издания [7, 8]. Экстрактивные вещества определяли, используя в качестве экстрагента воду дистиллированную и спирто-водные смеси разной концентрации от 20 до 90%, поскольку биологически активные вещества листьев бадана растворимы в данных растворителях. Критерием оценки при выборе экстрагента служило содержание арбутина в соответствующих извлечениях. Количественное содержание арбутина устанавливали по методике ГФ Х1 изд. фотоэлектроколориметрическим и спектрофотометрическим методами [9].
Для определения сроков заготовки зеленых листьев бадана сырье было собрано по фазам вегетации. Бадан имеет особый морфогенез и цикл развития, поэтому выделены следующие фазы вегетации: цветение (май), появление и развитие молодых листьев (июнь–август), плодоношение (август–сентябрь), потеря тургора (октябрь), покой (ноябрь–апрель).

Обсуждение результатов


Представлены результаты определения показателей доброкачественности зеленых листьев бадана. Влажность составила 6.59–8.43%, зола общая – 6.32–8.72%; зола, нерастворимая в 10%-ной соляной кислоте – 0.41–0.56%; органические примеси – 2.39–2.93%; минеральные примеси– 1.03–1.63%.
Следует отметить, что при определении экстрактивных веществ очень важен выбор экстрагента. Фенольные соединения в листьях бадана различны по химическому строению и по растворимости. В таблице 2 представлены результаты определения экстрактивных веществ при использовании различных растворителей. Наибольшее количество экстрактивных веществ и арбутина извлекалось дистиллированной водой, соответственно 49 и 21%, и 70%-ным этиловым спиртом –47, 8%. В последующем в качестве экстрагента использовали воду дистиллированную. В образцах сырья из разных мест произрастания содержание экстрактивных веществ колебалось от 45 до 53%

Важный показатель доброкачественности – количественное содержание биологически активных веществ. Мы предполагаем ввести стандартизацию зеленых листьев бадана по арбутину, который определяли йодметрическим, фотоэлектроколориметрическим, спектрофотометрическим методами.

Показатели доброкачественности зеленых листьев бадана, собранных из разных районов произрастания


Район произрастания Влажность, % Зола общая, % Зола, нерастворимая в 10%-ной НС1 органические, % минеральные, % Экстрактивные вещества, % арбутина,% дубильных веществ, %

Республика Алтай
Майминский район 8.30±0.41 6.72±0.04 0.50±0.006 2.39±0.81 1.03±0.41 48.46±0.12 20.41±0.17 20.57±0.40
Турочагский район 8.43 ±0.07 6.32±0.08 0.41±0.009 2.87±0.19 1.27±0.23 46.52±0.11 19.49±0.21 17.84±0.33
Чарышский район 7.86 ±0.02 8.35±0.08 0.45±0.004 2.65±0.32 1.38±0.15 45.15±0.22 13.46±0.27 15.84±0.52
Шеболинский район 7.55 ±0.14 8.72±0.05 0.50±0.007 2.93±0.52 1.41±0.12 53.40±0.11 22.33±0.16 25.13±0.46
Иркутская область Усть-Кутский район 7.47±0.05 7.85±0.03 0.56 ±0.009 2.42±0.68 1.51±0.28 49.51±0.19 21.01±0.19 22.54±0.30
Бурятия Северо-Байкальский район 6.59±0.07 6.72±0.04 0.45±0.011 2.59±0.42 1.63±0.21 50.67±0.15 22.14±0.24 21.17±0.42

Определение экстрактивных веществ и арбутина в зеленых листьях бадана при использовании различных экстрагентов


Экстрагент Содержание экстрактивных веществ, % Содержание арбутина, %
Вода дистиллированная 49.10±0.30 21.02±0.19
Спирт этиловый 20% 43.05±0.34 15.45±0.43
Спирт этиловый 40% 41.45±0.21 12.84±0.37
Спирт этиловый 70% 47.12±0.60 8.49±0.51
Спирт этиловый 90% 40.28±0.29 6.97±0.74

Количественное определение арбутина различными методами


Йодометрический метод Фотоэлектроколориметрия Спектрофотометрия
20.17 11.78 10.35
19.99 10.62 10.46
17.02 10.84 11.06
18.20 10.53 10.54
17.65 10.33 10.35
Хср=18.40±1.62 Sхср=1.3 E=8.98% Хср=10.82±0.70 Sхср=0.57 E=6.54% Хср=10.53±0.39 Sхср=0.31 E=3.7%
Ошибка определения йодометрическим методом составила 8.98%, фотоэлектроколориметрическим – 6.54%, спектрофотометрическим – 3.7%. В качестве метода для количественного определения арбутина в листьях бадана использовали спектрофотометрию, которая характеризуется быстротой и легкостью выполнения, хорошей воспроизводимостью. Количественное содержание арбутина в зеленых листьях бадана составило 13–22%, данные представлены в таблице 1. Результаты определения показателей доброкачественности зеленых листьев бадана, собранных по фазам вегетации, представлены в таблице 4.

Результаты определения показателей доброкачественности зеленых листьев бадана, собранных по фазам вегетации
Фаза вегетации Влажность Зола общая Зола, нераств. в 10%-ной НС1
Содержание экстракт. в-в
Содержание арбутина
Содержание дубильных веществ
Цветение 7.35±0.04 6.72±0.04 0.48±0.007 48.86±0.19 19.02±0.72 18.25±0.32
Появление и развитие молодых листьев 7.43±0.05 6.83±0.06 0.44±0.004 49.54±0.12 22.39±0.31 21.93±0.16
Плодоношение 6.70±0.08 9.69±0.05 0.53±0.006 46.53±0.15 18.01±0.26 23.25±0.42
Потеря тургора 6.73±0.02 7.25±0.03 0.53±0.003 45.83±0.27 15.65±0.24 21.19±0.51
Покой 6.23±0.05 7.03±0.08 0.51±0.005 45.08±0.19 10.54±0.35 20.14±0.72
Влажность составила 6.23–7.43%, зола общая –6.72–9.69%; зола, нерастворимая в 10%-ной соляной кислоте 0.44–0.53%; экстрактивные вещества – 45.08–49.54%; содержание арбутина – 10.54–22.39%; дубильных веществ 18.25–23.25%.
Фаза вегетации влияет на содержание биологически активных веществ и на показатели качества растительного сырья. Максимальное содержание арбутина, дубильных и экстрактивных веществ отмечено в листьях бадана, собранных в июне–августе (в молодых развивающихся листьях). Можно рекомендовать сроки заготовки сырья в фазу появления и развития молодых листьев в июне–августе. На качество сырья влияние оказывает срок хранения. Ранее нами установлен срок годности зеленых листьев бадана – 3 года [10].

Выводы


1. Установлены показатели доброкачественности зеленых листьев бадана, собранных из разных районов произрастания: влажность – 6.59–8.43%; зола общая – 6.32–8.72%; зола, не растворимая в 10%-ной НС1 – 0.41–0.56%; органические примеси – 2.39–2.93%; минеральные примеси – 1.03–1.63%; экстрактивные вещества – 45–53%; содержание арбутина – 13–22%; дубильных веществ – 15–22%.
2. Рекомендованы сроки заготовки зеленых листьев бадана – июнь-август, поскольку в данный период содержится максимальное количество арбутина (22%), дубильных веществ (22%), экстрактивных веществ (50%). Показано, что фаза вегетации значительно влияет на содержание биологически активных веществ и показатели качества сырья.

Список литературы


1. Гаммерман А.Ф., Гром И.И. Дикорастущие лекарственные растения России. М., 1976. 287 с.1. Первухин Ф.С. Дубильные растения и введение их в культуру. Новосибирск, 1963. 137 с.2. Федосеева Л.М. Фитохимический анализ листьев бадана толстолистного, произрастающего на Алтае //1 Межрег. фармац. конф. «Актуальные вопросы фармации на современном этапе». Новосибирск, 1998. C. 49–50.
3. Брюханов В.М., Федосеева Л.М. Влияние препаратов из листьев бадана на функцию почек в эксперименте // Фармакология и токсикология. 1992. №12. С. 26–29.
4. Муравьев И.А., Череватый В.С., Федосеева Л.М. Антимикробная активность препаратов из листьев бадана толстолистного / Деп. во ВНИИМИ №15303 от 04.05. 1988.
5. Федосеева Л.М. Изучение влияния режима сушки листьев бадана толстолистного на содержание фармакологически активных веществ // Тез. докладов ученых и специалистов Пятигорского фармац. ин-та «Наука – здравоохранению». Пятигорск, 1986. С. 51–52.
6. Государственная фармакопея. ХI изд. М.,1987. Вып. 1. 334с.
7. Государственная фармакопея. ХI изд. М.,1990. Вып. 2. 398 с.
8. Горбунцова Н.М., Федосеева Л.М., Горбикова О.А. Количественное определение арбутина в листьях бадана толстолистного // Актуальные проблемы фармации: Сб. научн. ст. Барнаул, 1995. С. 196–199.9. Федосеева Л.М. Фармакотехнологические исследования листьев бадана толстолистного: Автореф.дис. … канд. фармац. наук. Пятигорск, 1988. 19 с.